“ATP熒光法細菌總數快速檢測系統”簡稱“BL細菌快檢儀”,由試劑組、微量熒光檢測儀、樣品預處理耗材三部件組成。它是由本公司依據螢火蟲發光原理研制;經國家有關部門鑒定;關鍵試劑、組成部件均立足于國內;具有自主知識產權;與美、英、日同類產品性能相同,價格只及其一半的款國產細菌快檢設備。可用于檢測食品、飲料、原料乳中的細菌總數,也可供上述生產企業及檢疫、環保、水政、海關等單位衛生監控使用,1-5分鐘即能提供實時檢測數據,并具備準確、便攜、操作容易等特點。 螢火蟲會發光是由于它能合成將化學物質的化學能轉變為光能的生物催化劑—螢火蟲熒光素酶(簡稱蟲光素酶,luciferase)、蟲熒光素(D-luciferin)、以及所有細胞生物都產生的生物能量物質--三磷酸腺苷(ATP)。在有氧的條件下,蟲光素酶催化蟲熒光素和ATP之間發生氧化反應形成氧化熒光素并發出熒光, 只要具備適當條件,不僅螢火蟲,即使在試管中也能發出熒光。在一個反應系統中,當蟲光素酶和蟲熒光素處于過量的情況下,熒光的強弱取決于ATP的數量。因此,以檢測含細菌的樣品為例,細菌細胞越多,ATP量越高,發出的熒光也就越強。由于蟲光素酶對ATP的反應非常靈敏,熒光強弱可以通過熒光儀計量。所以,在排除樣品中非細菌ATP的干擾情況下,通過熒光值就能確定樣品中細菌ATP的含量,通過相對熒光值和細菌細胞數的關系曲線,就能快速確定樣品中細菌的細胞數。 應用領域及優特點 “快檢系統”可供食品、飲料、乳品加工生產的全程監測,以及環保、水政、海關檢疫等執法部門快速檢測各種樣品中的微生物(細菌總數)。表1、2分別列出使用“快檢系統” 實施全程監控過程及“快檢系統”和“常規平皿計數”方法的差別和利弊。 ATP熒光法細菌總數快速檢測系統技術指標 序號 | 項目名稱 | 標 準 | 1 | 檢測特性 | 分度裂解及0.45μm過濾,去除非細菌細胞的干擾 | 2 | 實際檢測靈敏度(菌落數) | 100cfu/ml(1cfu/ml使用濃縮器) | 3 | 量程范圍 | 0--1010cfu/ml | 4 | 實際檢測靈敏度(ATP) | 5×10-18mol | 5 | 本底計數率(s-1) | ≤50 | 6 | 與平皿計數相關性 | 98% | 7 | 8小時工作不穩定性 | ≤5% | 8 | 重復性(批間差) | ≤3% | 9 | 環境溫度 | 5-30℃ | 10 | 檢測器特性 | 光電倍增管及光子計數采樣模塊 | 11 | 供電電源 | ~220V 50Hz可使用充電電池 | 12 | 機身尺寸 | 160×105×50mm |
使用BL細菌快檢儀實施食品、飲料、乳品加工等全程衛生學監測 生產程序 | 監測內容 | 加工生產前 | 生產設施清潔、消毒效果檢測,原、輔料細菌總數檢測,以保障原料質量或明確原料品質級別。 | 加工生產過程中 加工生產后 廢棄物排放、環境、人員 | 生產設備關鍵控制點(例如供水、通風閥門)衛生學監測,影響乳品發酵飲料、酒類特殊微生物總數檢測。 制成品污染細菌總數檢測。 衛生學及細菌總數檢測。 |
兩種微生物(細菌總數)檢測方法的差別和利弊比較 | ATP熒光快檢 | 常規平皿計數 | 可檢范圍 獲得結果的時間 操作繁簡 結果的效應 | 所有細菌、真菌、藻類 1-5分鐘即得實時結果 簡單,步驟少 快速、預警、溯源 | 只能檢出可在特定培養基上生長的微生物(常用LB瓊脂皿只檢出需氧細菌) 需要多種特定培養基,需1-5天 煩瑣、步驟多、人為影響因素多 滯后、檢出結果保留時間長,有利于進一步化驗 |
故障排除 故障 | 可能原因 | 排除方法 | 在無過濾比色杯或樣品情況下,可拉動抽屜推入后,仍顯示高背景讀數 | 1、抽屜被樣品污染 2、高濕度影響設備 3、光敏部件有誤 | 1、用酒精擦抽屜去除污染 2、重新使用前在干燥情況下放置24小時 3、更換或檢修測光儀 | 有樣品的可拉動抽屜推入后無讀數 | 1、電池電量不足 2、直流電源接觸不良 3、斷電 4、可拉動抽屜關閉不嚴 | 1、如顯示電池電量不足,可更換電池或改用直流電源 2、檢查和改善接觸 3、查對供電情況 4、重新關閉抽屜 | 給出的讀數顯著低于應有讀數 | 1、可拉動抽屜不干凈 2、濕度高 3、加入LLR試劑組后沒有立即關閉抽屜讀數 4、樣品經冷凍或冷藏后使其中的細菌細胞內ATP量顯著降低 | 1、擦凈可拉動抽屜 2、使用前在干燥情況下放置24小時 3、更換樣品,重新試驗讀數 4、待樣品及試劑恢復到室溫后再測定 |
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